一、儀器和試劑
(1)儀器 熒光光度計(jì)、四面通石英比色皿一個(gè):1cm 、1和2 mL刻度移液管各一支、吸耳球、洗瓶、鏡頭紙。
(2)試劑 10.0μg/ml維生素B2標(biāo)準(zhǔn)溶液、二次蒸餾水
二、實(shí)驗(yàn)步驟
(1). 打開氙燈,再打開主機(jī),然后打開計(jì)算機(jī)啟動(dòng)工作站并初始化儀器,預(yù)熱30min
(2) 儀器初始化完畢后,在工作界面上選擇測(cè)量項(xiàng)目,設(shè)置適當(dāng)?shù)膬x器參數(shù):設(shè)置發(fā)射波長為540 nm,在200~500范圍內(nèi)掃描,紀(jì)錄熒光發(fā)射強(qiáng)度和激發(fā)波長的關(guān)系曲線,便得到激發(fā)光譜。從激發(fā)光譜圖上可以找出其zui大激發(fā)波長為440nm
(3)標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品的熒光測(cè)定
將激發(fā)波長固定在440nm,熒光發(fā)射波長為540nm。測(cè)量上述系列標(biāo)準(zhǔn)維生素Bz溶液的熒光發(fā)射強(qiáng)度。以溶液的熒光發(fā)射強(qiáng)度為縱坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
在同樣條件下測(cè)定未知溶液的熒光強(qiáng)度,并由標(biāo)準(zhǔn)曲線確定未知試樣中維生素Bz的濃度,計(jì)算藥片中的維生素Bz的含量。
(4)退出主程序,關(guān)閉計(jì)算機(jī),先關(guān)主機(jī),zui后關(guān)氙燈。