紫外分光光度計(jì)由于準(zhǔn)確度高、測(cè)定限度低、設(shè)備簡(jiǎn)便、儀器成本低、易于操作等優(yōu)點(diǎn),已成為制藥生產(chǎn)中*的檢測(cè)設(shè)備之。
紫外分光光度法是通過(guò)測(cè)定物質(zhì)在某些特定波長(zhǎng)處或一定范圍內(nèi)的吸光度或發(fā)光強(qiáng)度,定性和定量對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分析的方法,其理論基礎(chǔ)為朗伯-比耳定律,溶液的吸光度與吸光物質(zhì)含量、液層厚度乘積成正比。對(duì)于一般的紫外分光光度法,其測(cè)量的相對(duì)誤差在1%~3%。隨著大量新的顯色劑的合成及應(yīng)用,尤其是有關(guān)多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,推進(jìn)了元素測(cè)定的靈敏度的大幅提高。采用預(yù)富集和示差法,適用質(zhì)量分?jǐn)?shù)從常量(1%~ 50%)到痕量(10-1°~10-8)。
在各國(guó)藥典中,藥品的理化常數(shù)、鑒別、檢査和含量測(cè)定等各個(gè)項(xiàng)目中,都能見(jiàn)到紫外分光光度法的應(yīng)用實(shí)例。目前利用
紫外分光光度計(jì)分析的藥物品種有維生素、抗生素、解熱藥、去痛藥、降血壓藥、安定藥、鎮(zhèn)咳藥、滴眼藥、磺胺類藥、利尿藥、某些婦科藥、痢疾藥、腹瀉藥、抗腫瘤藥、抗結(jié)核藥等。
在藥典和藥品標(biāo)準(zhǔn)中應(yīng)用紫外分光光度法的項(xiàng)目有吸收系數(shù)、鑒別、顏色檢査、純度檢査、溶出度、含量均勻度檢査和含量測(cè)定等。在制藥生產(chǎn)中,紫外分光光度法應(yīng)用*多的是藥物含量的測(cè)定、藥物雜質(zhì)檢測(cè)、藥物穩(wěn)定性考察、釋放度、藥物負(fù)載行為測(cè)定及物質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒定等方面。
藥物含量測(cè)定:
藥品的含量是評(píng)定藥品的主要指標(biāo),在設(shè)計(jì)其測(cè)定方法時(shí),含量測(cè)定方法的選擇要著眼于準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和可重復(fù)性。紫外分光光度計(jì)操作簡(jiǎn)單、具有較高的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性,現(xiàn)可以直接用于藥品含量的檢測(cè)。目前紫外分光光度計(jì)檢測(cè)較多的藥物劑型包括片劑、膏劑、注射劑等。
1片(滴丸)劑中含量測(cè)定:
紫外分光光度法測(cè)固體制劑中藥品含量,需制備已知含量的標(biāo)準(zhǔn)品溶液和樣品溶液,測(cè)定*吸光度處波長(zhǎng);然后以含量為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線;取已配制好樣品溶液適量,置于石英比色皿中,在*吸光度波長(zhǎng)處測(cè)定溶液吸光度,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的含量。
蓋柯等用紫外分光光度法在297nm處,測(cè)定了小劑量阿司匹林腸溶片的含量。2013年,郭錦明等人在原有的阿司匹林溶出乙酰水楊酸含量測(cè)定的基礎(chǔ)上加以改進(jìn),將測(cè)試波長(zhǎng)從可見(jiàn)光區(qū)遷移到紫外光區(qū),改進(jìn)后的方法操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確,專屬性強(qiáng),并將此方法運(yùn)用在藥劑實(shí)驗(yàn)教學(xué)。
如果有些片劑藥物沒(méi)有強(qiáng)的生色基團(tuán),沒(méi)有紫外吸收或是吸收很弱,不能用紫外分光法檢測(cè)器直接檢測(cè)的情況下,可以通過(guò)將其與生色基團(tuán)衍生,生成有紫外吸收的衍生物來(lái)檢測(cè)其的含量。1993年,Drazen等人利用阿侖膦酸鈉易與金屬鰲合的性質(zhì),建立了阿侖膦酸鈉與Cu2+鰲合形成具有紫外吸收的衍生物,從而可用普通的紫外分光光度計(jì)檢測(cè)阿侖膦酸鈉的含量。在此基礎(chǔ)上,2000年,Kuljan in 等人通過(guò)將阿侖膦酸鈉與Fe3+絡(luò)合,用紫外分光光度法測(cè)定了阿侖膦酸鈉的含量,可檢測(cè)質(zhì)量濃度2 |xg/mL 的量。
利用同樣的原理,通過(guò)鋁敏化紫外分光光度法,在pH=6.30的緩沖溶液中測(cè)定片劑中依諾沙星含量,可檢測(cè)的濃度在0.4~37.5 |xmol ? L-1,檢出限為 0.125 |xmol ? L-1,此方法測(cè)定依諾沙星片劑的含量靈敏、簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確[。另外,2008年,Walash等人利 用Cu2+和利塞膦酸鈉鰲合,形成具有紫外吸收的衍生物,簡(jiǎn)單、快速、地測(cè)定出了利塞膦酸鈉的含量,該方法的檢測(cè)范圍是2~40 |xg/mL,檢測(cè)*限度是 0.03 |xg/mL。