紫外分光光度計(jì)法測(cè)多糖
對(duì)照品溶液的制備取無(wú)水葡萄糖對(duì)照品適量,精密稱
定,加水制成每lm l含0. 25mg的溶液,即得。
供試品溶液的制備精密稱取本品約lg,置索氏提取器
中,用85%乙醇提取至無(wú)色,取出,殘?jiān)鼡]盡乙醇,置100ml
量瓶中,加沸水使溶解,冷卻至室溫,加水至刻度,搖勻,離心
10分鐘(轉(zhuǎn)速為每分鐘300轉(zhuǎn)),取上清液,備用。
總糖供試品溶液的制備精密量取供試品溶液5ml,加
6mol/L鹽酸溶液5ml,置沸水浴中加熱30分鐘后,取出,冷
卻,加酚酞指示液1 滴,用6mol/L氫氧化鈉中和至微紅色,
定量轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中,并稀釋至刻度,搖勻,離心,取上清
液,備用。
還原糖供試品溶液的制備精密量取供試品溶液5ml,
置25ml量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得。
測(cè)定法精密量取對(duì)照品溶液、總糖供試品溶液及還原
糖供試品溶液各2ml,置25ml量瓶中,分別加入3,5-二硝基
水楊酸溶液1.5ml,搖勻,置沸水浴中加熱5 分鐘,迅速用涼
水冷卻,加水至刻度,搖勻,以水2ml,同法制成空白溶液。照
紫外-可見(jiàn)分光光度法(通則0401)測(cè)定。在530nm波長(zhǎng)處分
別測(cè)定吸光度,計(jì)算,即得。
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