皮膚癌是發(fā)病率較高、較為常見的癌癥類型之一，而在眾多的皮膚癌類型中，黑素瘤是最危險的一種。據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)估計，每年因黑素瘤而死亡的患者數(shù)量達65,000例。其中約95%的黑素瘤都是因皮膚暴露于紫外線輻照下引發(fā)的。正是由于紫外線對皮膚的巨大殺傷作用，防曬霜對于使用者而言，其意義不僅僅是防止曬黑，更擁有降低黑素瘤發(fā)病幾率的重要意義。

市場上林林總總的防曬霜產(chǎn)品大多通過添加能主動過濾紫外線輻射的化學成分來實現(xiàn)“防曬”的作用，如果化學成分含量不足，則會讓防曬效果大打折扣，“防曬”名不副實。然而如果長期接觸過量的化學成分也可能增加皮膚對陽光過敏的風險。因此，我國《化妝品衛(wèi)生標準》(GB7916-1987)明確規(guī)定了防曬產(chǎn)品添加的相關化學成分的含量。

對于化妝品生產(chǎn)商和監(jiān)管機構、第三方檢測機構而言，如果能夠同時檢測防曬霜配方中的多種成分，能夠大大提升其效率。在傳統(tǒng)的檢測方法中，業(yè)界通常使用HPLC進行檢測，然而，由迄今為止已發(fā)表的相關文獻可以看出，HPLC分析方法存在一些缺點，例如會縮短HPLC級色譜柱的使用壽命并且/或者需要使用有毒溶劑等。 

針對這一需求，本文介紹了一種利用ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統(tǒng)與UV和質(zhì)譜檢測器聯(lián)用的方法，能夠在開發(fā)高效分離、檢測和定量分析防曬霜活性成分的分析方法時，準確記錄方法開發(fā)行為。我們分別在Waters ACQUITY UPLC H-Class PLUS和ACQUITY UPLC H-Class系統(tǒng)上使用兩種色譜柱填料對含有六種紫外線化學過濾劑的混合物進行分離和檢測，然后測定并比較了兩套系統(tǒng)的典型系統(tǒng)適應性參數(shù)，結(jié)果表明兩套系統(tǒng)性能相當。

解決方案

分析標準品購自Sigma-Aldrich Ltd(英國多塞特郡普爾)。使用水：甲醇 (60:40)配制濃度為25 g/mL的標準品溶液，供UPLC分析使用。使用ACQUITY UPLC HSS PFP色譜柱(1.8 m，2.1 x 50 mm，部件號：186005965)和ACQUITY UPLC BEH C8色譜柱(1.7 m, 2.1 x 50 mm，部件號：186002877)進行UPLC分離，流速為0.5 mL/min，使用通用梯度：初始為40% B保持1 min，4.5 min時增加至95% B，隨后保持2.5 min，最后回到40% B，重新平衡1 min。流動相由A(水)和B(甲醇)組成，二者均含0.1%甲酸，進樣體積為5 L。使用Empower 3 CDS軟件測定保留時間和峰面積，并計算五次重復進樣的平均結(jié)果。

分別在ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統(tǒng)上使用相同的流動相、梯度和進樣體積，使用兩種色譜柱填料分析六種防曬霜活性成分。圖1是在兩套系統(tǒng)上使用ACQUITY UPLC BEH C8色譜柱分離六種化合物得到的色譜圖。圖2是在兩套系統(tǒng)上使用ACQUITY UPLC HSS PFP色譜柱分離同樣的六種分析物得到的色譜圖。如圖3所示，兩套系統(tǒng)分離所有目標化合物得到的保留時間和峰面積都相當。以%RSD來衡量保留時間重現(xiàn)性，ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統(tǒng)的%RSD分別小于0.2%和0.04%。以上數(shù)據(jù)表明分析方法在ACQUITY UPLC H-Class和H-Class PLUS系統(tǒng)上均具有良好的重現(xiàn)性，因此，在ACQUITY UPLC H-Class系統(tǒng)上驗證過的分析方法可直接在ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統(tǒng)上運行，無需進行重新驗證。

圖1. 分別在ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統(tǒng)上使用ACQUITY UPLC BEH C8色譜柱填料分離各種防曬霜活性成分標準品得到的疊加色譜圖。

圖2.分別在ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統(tǒng)上使用ACQUITY UPLC HSS PFP色譜柱分離各種防曬霜活性成分標準品得到的疊加色譜圖。

圖3. ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統(tǒng)的代表性保留時間和峰面積數(shù)據(jù)。

總結(jié)：ACQUITY UPLC H-Class PLUS系統(tǒng)是一種穩(wěn)定可靠的分析技術，可準確分析化妝品中的防曬霜活性成分。本系統(tǒng)具有卓越的重現(xiàn)性，有助于生產(chǎn)商在防曬霜生產(chǎn)的QC監(jiān)測中準確鑒別批次間的差異。